土壤酸性磷酸酶S-ACP˅活性测定试剂盒

土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性测定试剂盒说明书 
                                                                        分光光度法    50 管/48 样 
测定意义?                                                       
土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶?其活性的高?直接影响着土壤中有机磷的分解
转化及其生物有效性?是评价土壤磷素生物转化方向о强度的指标?土壤磷酸酶?到土壤碳?
氮含??有效磷含?和 pH 显著影响?根据zui适 pH 范围?通常分为酸性?中性和碱性й种
类型? 
测定原理? 
酸性环境中?S-ACP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠?通过测定酚的生成?即
??算出 S-ACP 活性? 
自备仪器和用品? 
?见分光光度???式离心机?37℃恒温培养箱?分析天???调式移液器?1mL 玻璃比
色皿?冰?蒸馏水?乙醇和甲苯? 
试剂组成和配制? 
试剂一?液体×1 瓶?4℃避光保存? 
试剂二?粉剂×1 瓶?4℃保存?用前加 50mL蒸馏水充分溶解? 
试剂й?液体×1 瓶?4℃保存? 
试剂四?粉剂×1 瓶?4℃避光保存?临用前加 1152µL无水乙醇?自备? ?48 µL蒸馏水充分
溶解? ??褐色后н能再使用? 
标准品?液体×1 瓶?0.5 µmol/mL苯酚标准液?4℃保存? 
粗酶液提?? 
??风?混匀土壤约 0.1g?加入 0.05mL甲苯?自备? ?轻摇 15min?加 0.4  mL试剂一并且
摇匀后?置于 37℃恒温培养箱?开始?时?催化反应 24h?到时后迅速加入 1mL 试剂二充
分混匀?以终止酶催化的反应?10000rpm室温离心10min??к清液置于冰к待测? 
土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性测定试剂盒说明书 测定步骤? 
1.  分光光度?预热 30 min 以к?调节波长到 660 nm?蒸馏水调零? 
2.  空白管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL 蒸馏水?100 µL试剂й?20 µL试剂四?充分
混匀?显色后再加蒸馏水830 µL?混匀后室温静置 30 min?于 660 nm测定吸光度?记为A
空白管? 
3.  标准管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL 标准液?100 µL试剂й?20 µL试剂四?充分
混匀?显色后再加蒸馏水830 µL?混匀后室温静置 30 min?于 660 nm测定吸光度?记为A
标准管? 
4.  测定管?? 1mL玻璃比色皿?加入 50 µL к清液?100 µL试剂й?20 µL试剂四?充分
混匀?显色后再加蒸馏水830 µL?混匀后室温静置 30 min?于 660 nm测定吸光度?记为A
测定管? 
土壤酸性磷酸酶?soil acid phosphatase?S-ACP?活性测定试剂盒说明书 S-ACP 活性?算? 
活性单?定义?37℃中?克土壤?天释放 1µmol酚? 
S-ACP?U/g?=[C 标准液×(A测定管ˉA空白管)÷(A 标准管ˉA 空白管)]×V总÷W÷T   
=0.725×(A测定管ˉA空白管)÷(A标准管ˉA空白管)÷W 
C 标准液?0.5  µ  mol/mL?  V 总?催化体系总体??1.45mL?W?土壤样品质??g?T?