小鼠（Cortisol）ELISA试剂盒 返回列表页

小鼠(Cortisol)ELISA试剂盒本试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体样本中含量。
实验原理：
   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中该产品水平。用纯化的本产品抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入本产品抗原，再与HRP标记的本产品抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的本产品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中该小鼠(Cortisol)ELISA试剂盒浓度。
试剂盒组成：
试剂盒组成    48孔配置    96孔配置    保存
说明书    1份    1份    
封板膜    2片（48）    2片（96）    
密封袋    1个    1个    
酶标包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
标准品：1800ng/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
标准品稀释液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶标试剂    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
样品稀释液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
显色剂A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
显色剂B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
终止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
浓缩洗涤液    （20ml×20倍）×1瓶    （20ml×30倍）×1瓶    2-8℃保存
标本要求： 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1200 ng/L，800 ng/L ，400 ng/L，200ng/L， 100 ng/L）。
小鼠(Cortisol)ELISA试剂盒2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

小鼠(Cortisol)ELISA试剂盒计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，    
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD      
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释      
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标      
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值      
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释      
倍数，即为样品的实际浓度。                                                               
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%     
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存；2-8℃。
2．有效期：6个月
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990395    Starter Pack, QIAcube
990399    Spin Column Adapter Rings (25)
990452    Filter-Tips, 1000 µl, wide-bore (1024)
990512    50 µl Conductive Filtered Tips
990522    200 µl Conductive Filtered Tips
990532    50 µl Filtered Sterile Tips (960)
990542    200 µl Filtered Sterile Tips (960)
990550    Tip Receptacle Box
990552    5 ml Tube; Graduated, Flat-Base
990554    Reagent Trough 70 ml
990556    Reagent Trough 170 ml
990558    Reagent Trough 270 ml
990890    TissueRuptor Disposable Probes (25)
997002    Sample Prep Cartridges, 8-well (336)
997004    8-Rod Covers (144)
997008    Reagent Cartridge Holder (2)
997012    Accessory Trough (10)
997024    Filter-Tips, 1500 µl (1024)
1014636    Buffer G2 (260 ml)
1030058    BioSprint 15 Plasticware (130)
1030481    Caps for Elution Microtubes (55 x 8)
1031576    Buffer TCL (125 ml)
1031586    Buffer TCL, 2x (8.5 ml)
1031656    96-Well Microplates MP (20)