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实验室常见实验技术介绍
点击次数:911 发布时间:2018-7-16
细胞培养、分子克隆、免疫印迹法 (Western blotting,WB) 是生命科学实验室及基础医学实验室中常见的实验技术。广泛应用于高校、科研院所实验室,基础医学实验室,生物产业相关企业中。
一、细胞培养
也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个*的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术*的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中核心、基础的技术。
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二、分子克隆
是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。
常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。
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三、免疫印迹法 (Western blotting,WB)
一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。
免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法 Southern blot 相类似,亦被称为Western-blot.
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