人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒 Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISA KIT
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我们的elisa试剂盒具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
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人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒 ELISA技术原理:以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底
物的高效催化作用相结合起来
1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记 的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6. 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量 与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析。
测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重复性好。
我们采用的酶: 辣根过氧化酶(HRP)
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD。
3. 是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合 而成的一种卟啉蛋白质。
4. 主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有zui高吸收峰;辅基是深 棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有zui高吸收峰。
HRP催化下列反应:
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2为供氢体,H2O2为受氢体。HRP对受氢体的专一 性很高,除H2O2外,仅作用于小分子醇的过氧化物和尿素的过 氧化物。
后者为固体,作为试剂较H2O2方便。许多化合物可作 为HRP的供氢体,在ELISA中常用的供氢体底物为邻苯二胺(orthopenylenediamine,OPD)、
四甲基联苯胺(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒
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