细胞名称

PA317 暂不供应小鼠成纤维细胞

描述

PA317细胞株源自TK- NIH/3T3细胞，通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。 通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞，结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。 这株细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类。 可能因为用于构建这株细胞而转入的DNA丢失，能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。 在包含0.03 mM 次黄嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择，可以选出保留了包装功能的细胞。 选择后，细胞应在HT培养基(0.03 mM 次黄嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培养4天，以稀释残留的氨甲喋呤。 Cells shipped from the ATCC have been selected in medium containing 0.03 mM hypoxanthine, 0.001 mM amethopterin (methotrexate), and 0.02 mM thymidine prior to freezing, and should be grown in HT medium for 4 days after receipt. 此后细胞不需选择可以稳定至少1个月。

动物种别

小鼠

性别

***

组织来源

胚胎

形态

成纤维细胞

培养基和添加剂

DMEM培养基(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。

供应限制

REFERENCE

Miller AD , Buttimore C . Redesign of retrovirus packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production. Mol. Cell. Biol. 6: 2895-2902, 1986. PubMed: 3785217 Miller AD . DNA contructs for retrovirus packaging cell lines. US Patent 4,861,719 dated Aug 29 1989 Rosenberg SA , et al. Gene transfer into humans--immunotherapy of patients with advanced melanoma, using tumor-infiltrating lymphocytes modified by retroviral gene transduction. N. Engl. J. Med. 323: 570-578, 1990. PubMed: 2381442 Chin J Cell Mol Immunol 18(2):146-148, 2002 Shanghai Immunol Journal 23(1):16-19,2003