当前位置:江苏绿叶生物科技有限公司>>技术文章>>ELISA检测试验中的复孔稀释的重要性
虽说ELISA检测法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,但是在实验中或多或少会出现一些问题,复孔的稀释也不例外,ELISA检测试验中的复孔稀释的重要性你知道吗?
近日,南京农业大学朱老师来电表明了自己的实验疑惑:“设计ELISA复孔检查时,是对同一个样品作两次稀释,再分别加到板上的两个孔,还是只稀释一次,然后吸取两次分别加到两个孔?前者似乎把稀释时的误差也考虑到了,但做出来的结果两个孔相关挺大的。而较常使用的是哪种稀释方法?
为了减小误差,是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问,我公司技术人员是这样解说的:
1. 前者测的是稀释和移液的误差,后者只有移液误差。
2. 一般都是稀释一次,分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由于是从同一原液稀释,一般不考虑稀释误差(稀释误差是存在的),都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是一一稀释,这样可以使稀释误差减小)。
4. 复孔是为了排除移液体积,板的影响,以及其他系统误差的,要求复孔的浓度是一致的。稀释后分孔能满足此要求,一一稀释不能。
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