人纤溶酶原(Plg) ELISA试剂盒

操作步骤：

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后立即进行检测。

人纤溶酶原(Plg) ELISA试剂盒

ELISA临床意义
●各型肝炎的特征及标志物
乙肝二对半的模式及临床意义
HBsAg  HBeAg  HBcAb-IgG   HBcAg-IgM   HBeAb    HBsAb         临床意义
 +　　　　+　　　　- 　　　　 -　　　　-　　　　-　　　　急性HBV感染早期HBV复制活跃
 +　　　　+　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV复制活跃
 +　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV复制中跃
 +　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　+　　　　-　　　　急慢性HBV感染，HBV复制低跃

 +　　　　-　　　　+　　　　　-　　　　+　　　　-　　　　HBV复制停止或极低
 -　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　-　　　　平静的HBV携带状态，HbsAg

 -　　　　-　　　　+　　　　　-　　　　-　　　　-　　　　HBV既往感染，未产生抗-HBs
 -　　　　-　　　　+　　　　　+　　　　+　　　　-　　　　抗HBs出现前期，HBV复制低
 -　　　　-　　　　+　　　　  -　　　　+　　　　+　　　　HBV感染恢复期
 -　　　　-　　　　+　　　　  -　　　　-　　　　+　　　　HBV感染恢复期
 +　　　　+　　　　+　　　　　+　　　　-　　　　+　　　　不同亚型ＨＢＶ再感染
 +　　　　-　　　　-　　  　　-　　　　-　　　　-　　　　ＨＢＶ－ＤＮＡ整合
 -　　　　-　　　　-　  　　　-　　　　-　　　　＋　　　病后或接种疫苗后获得免疫　


人纤溶酶原(Plg) ELISA试剂盒