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纪宁实业|细胞培养出现污染怎么处理?

时间:2023-10-17阅读:198
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培养细胞可不是一件简单的事,一不小心就出现污染的情况,捧着被污染的细胞感叹∶细胞真是太难养了。细胞一旦污染就很难救回来,更严重的是一个细胞的污染可能会导致实验室内细胞全部受到影响。下面,带大家了解一下出现污染后的应对方法。

1.细菌污染

细菌在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。根据感染菌的种类不同,可能会呈现不同的形状,培养液一般会变得浑浊、黄色,对细胞生长有明显影响。

解决方法:仔细检查器具的灭菌情况,确保通风时间和高压灭菌器的压力是否足够。重要的是,与培养基接触的移液管等物品如果被污染两次s则可能会导致储存溶液也受到污染。所以一定要注意!下次使用要检查培养基的浑浊度。此外,建议在培养基中添加抗生素。

2.支原体污染

支原体是隐藻的污染物,不能通过过滤去除。显微镜下没有任何可见的支原体污染迹象﹐比如细胞病变和浊度或p值变化《即使在严重污染的培养基中>﹐这样就会导致我们产生错误的安全感。而在牛血清中,支原体是常见的微生物。

解决方法:通常的过滤灭菌方法对支原体没有影响。细胞一旦被支原体污染>特别是对重要的细胞系,必须去除支原体,一般的方法有抗生素治疗﹑抗血清治疗和抗血清与补体联合治疗。值得注意的是,支原体突出的结构特征是没有细胞壁。因此,它对作用于细胞壁的生物合成抗生素(如β-内酰胺类等>不敏感,并且通常对多粘菌素和磺胺类药物具有耐药性。相反,四环素类和大环内噩类抗生素对支原体的抑制作用强,而氨基糖苷类的抑制作用较弱。

3.黑点污染

黑色的游动点能穿透滤膜并在空气中扩散。它们在低倍镜下显示为黑色圆点,在高倍镜下显示为可移动的黑色斑点。培养液也不浑浊,一般影响较小,因此细胞仍可使用。通常,黑点污染后,细胞生长良好,运动物体无明显增加·培养基的颜色和逶明度无明显变化·在同一批血清培养的细胞中也可以发现类似的现象。

解决方法:黑点对细胞生长状态没有明显影响,细胞增殖后会自然消失,因此除了血清置换外,无需特殊处理。如果细胞可能被小的运动点污染,建议增加培养皿细胞密度,以提高细胞存活率。

4.真菌污染

真菌污染后,培养基一般清激,保持原色。细丝可以在显微镜下观察到。初,一些真菌类似于死细胞碎片,但其中许多清晰可见,看起来像珊瑚>比较容易区分。此外,它们会慢慢长出细细的黑色细丝,因为它们生长得比较慢,不像细菌那样容易被发现,一旦发现培养基祯污染s它们将很难存活。

解决方法:一旦被真菌污染,果断丢弃,然后对细胞房、CO2培养箱、器皿和培养基进行消毒。

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