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通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等 塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA试剂盒操作中,洗涤是zui主要 ,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
洗涤的方式除某些ELISA试剂盒仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)ELISA试剂盒浸泡式
a.吸干或甩干孔内反应液;
b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分 钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸 上拍干;
e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)
认为ELISA试剂盒法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
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