在竞争法ELISA试剂盒中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量，一般调节阴性对照的吸光度在1.0-1.5之间，此时反应zui为敏感。在实验条件(包括试剂)较难保证恒定的情况下，这种判断法较为合适。在得出标本(S)和阴性对照(N)的A值后，计算S/N值。

    也有写作P/N的，这里的P不代表阳性(positive)，而是病人(patient)的缩写，不应误解。为避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的间接法ELISA试剂盒中，有些作者定出S/N为阳性标准，现多为各种测定所沿用。实际上每一该用求出各自的S/N的阈值。更应注意的是，N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液，以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。因此，这类ELISA试剂盒规，如N<0.05(或其他数值)，则按0.05计算，否则将出现假阳性结果。

抑制率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的抑制程度，按下式计算：
抑制率(%)= (阴性对照A值-标本A值)×100%/阴性对照A值
ELISA试剂盒一般规定抑制率≥50%为阳性，<50%为阴性。