日前，有位客户在留言中问道：“做内标法，说用的是内标物，这个内标物和对照品和标准品有什么不同呢？"针对该问题，我公司做出了一个全盘解析：

*、什么是内标物？
将一个已知质量，样品中不含有杂质的纯物质，加入至待测样品溶液中，以此纯物质的量为标准，对比测定待测组分的含量，该纯物质称为内标物。

内标物需满足下列要求：能*溶解于样品中，且不与待测组分发生化学作用；峰位尽可能与待测组分的峰位靠近，但能与待测组分*分开（分离度R≥1.5）的纯物质。若得不到纯品，必须预先测定其准确含量，且杂质峰不得干扰待测组分峰。

第二、ELIS试剂盒实验内标法的优点
测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序较为麻烦，每次分析时内标物和试样都要准确称量，有时寻找合适的内标物也有困难。 外标法简便，但进样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得不到准确的测量结果。

第三、ELIS试剂盒实验内标物需满足的条件
内标法是结合了峰面积归一法和外标法的优点的一种方法，它在加入内标后，按峰面积归一法的分析方法进行分析，这就避免了由于进样的一致性及样品歧视效应导致的偶然误差，因而，它的分析精密度也是比较高的，是气相色谱的一种比较理想的定量分析方法。它的弱点是前处理比较复杂，所花费的时间也比较长，同时必须要有合适的标样及内标物才能进行内标法定量分析。对于内标法定量分析来说，内标物的选择是及其重要的。

它必须满足如下的条件：
① 内标物与被分析物质的物理化学性质要相似；
② 内标物应能*溶解于被测样品（或溶剂）中，且不与被测样品起化学反应；
③ 内标物的出峰位置应该与被分析物质的出峰位置相近，且又不共溢出，目的是为了避免GC的不稳定性所造成的灵敏度的差异；
④ 选择合适的内标物加入量，使得内标物和被分析物质二者峰面积的匹配性大于75%，以免由于它们处在不同响应值区域而导致的灵敏度偏差。

第四、ELIS试剂盒实验内标法的操作
① 将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
② 注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。
③ 根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f×A，制成标准曲线。
④ 将已知量的内标样加入未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。
⑤ 根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度。

第五、ELIS试剂盒实验内标法的特点
操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样体积的变化不会影响影响定量结果。
内标法抵消了上样体积，乃至流动相、检测器的影响，因此比外标法。