1.类风湿因子（rheumatoid factors,RF）在类风湿病人、别的疾病以及正常人血清中,常富含较高或不一样浓度的RF，RF通常为TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有与变性IgG发作非特异的特色，由于在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后参加的酶标的特异抗体IgG，然后呈现假阳性成果。尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中体现zui为显着，由于此时固相包被的抗体为抗人弘链抗体，IgM型RF的存在可使其很多于固相。为避免RF对ELISA测定的搅扰，通常可以采纳下述办法：
（1）稀释标本：这在判别急性病原体传染的特异IgM抗体如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗体查验等尤为有用。由于急性传染时，血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高，而RF滴度通常相对要低得多。因而，在测定前对标本进行稀释，特异的IgM因高滴度存在仍可检出，而非特异的RF则会由于稀释变成十分低的滴度，然后对测定几乎不发作搅扰。如今，有些特异IgM检查ELISA试剂盒不请求稀释标本，直接检查，这么虽然方便了实验室技术人员的操作，但简单呈现假阳性成果，而且由于某些慢性传染，如HBV的传染，血循环中抗HBelgM可继续以必定的滴度存在，标本不做稀释即进行检查，即可呈现阳性成果，然后失掉抗HBclgM用于HBV急性传染的确诊价值。因而，在临床实验室，必定要运用请求对标本做1:1000稀释的试剂盒进行查验，然后确保相应检查项目成果的可靠性及临床运用价值。
（2）改变酶标抗体：由于RF的是IgG的Fc片段，假如将待酶标的抗体的F，片段酶切夫除，仅留下具有特异功用的F（ab’）2部分符号酶，则在测定中即可避免RF的搅扰。
（3）标本中RF用变性IgG预先关闭：将经热变性（63℃，10min）的动物如兔、羊等的IgG参加到标本稀释液中，或是将该变性IgG衔接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后参加临床血清标本，反响后，再吸出标本进行检查。此外，在测定特异IgM时，也可运用抗人IgG去掉临床标本中RF和IgG。
（4）测定抗原时，可在标本中参加可使RF降解的还原剂：如2—巯基乙醇。2—巯基乙醇等还原剂可使抗体内的巯基裂解，因而可以去掉RF的搅扰，但只适用于抗原测定。
（5）包被或酶标二抗运用特异的鸡抗体IgY：RF不与鸡IgY反响，假如包被和酶标二抗均为鸡IgY抗体，则不受标本中RF的搅扰。
2.补体在固相酶免疫测定中，来自哺乳动物的固相特异抗体和酶标二抗均有激活人补体体系的功用。一方面，固相抗体和酶标二抗可由于其在固相吸附及过程中，抗体分子发作变构，然后其F, 段的补体C1，位点被露出出来，这么C1，就变成一个中介物将二者交联起来，然后呈现假阳性成果。另一方面，固相抗体也会由于活化补体的，关闭抗体的抗原表位才能，而致使假阳性成果或使定量测定成果偏低。由补体致使的搅扰可通过下述办法避免：
（1）对临床血清标本加热灭活补体：选用56~C30min加热可使标本中的补体C1。灭活。
（2）包被或酶标二抗运用特异的鸡抗体：鸡抗体不激活人的补体体系，因而，运用特异的鸡抗体，不会呈现因补体激活而存在的假阳性和假阴性搅扰。
3.异嗜性抗体（heterophilieantibodies）人类血清中富含抗啮齿类动物（如鼠、马、羊等）的免疫球蛋白（lg）的抗体，即天然的异嗜性抗体。有研讨表明，天然的异嗜性抗体（lgG）可分为两类，一类（85%的假阳性由其致使）可于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域，但不与兔IgG的Fab区。另一类（15%的假阳性由其致使）可于小鼠、马、牛和兔IgG的Fc区表位，但不与山羊和大鼠IgG的Pc区表位。异嗜性抗体可通过交联固相和酶标的单抗或多抗而呈现假阳性反响。由异嗜性抗体致使的搅扰可通过下述办法避免：
（1）运用特异的兔F（ab’）2。片段作为固相或测定酶标抗体。
（2）在标本或标本稀释液中参加过量的动物Ig，关闭也许存在的异嗜性抗体。但参加量缺乏或亚类不一样时无效。
（3）运用靶特异的非Ig亲和蛋白（affibody）代替固相或酶标抗体之一。选用噬菌展现来自单个金葡萄球A蛋白（SPA）联合文库的人IgA亲和蛋白，用于IgA的测定，不受异嗜性抗体的影响。
4.因运用鼠抗体医治或确诊诱导的抗鼠Ig抗体在临床上，有尝试运用鼠源性单克隆抗体进行靶向医治，及运用放射性核索符号鼠源性单克隆抗体进行印象确诊等，均有也许使相应病人体内发作抗鼠抗体。这种抗鼠抗体对运用鼠源性单克隆抗体的酶免疫测定，可发作假阳性成果。由抗鼠抗体致使的搅扰可通过下述办法避免：
（1）运用的特异的抗体（F，。bf）:片段作为固相或测定酶标抗体。
（2）在标本或标本稀释液中参加过量的鼠Ig，关闭也许存在的抗鼠抗体。
（3）运用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体。鸡IgG不与人抗鼠抗体反响。因而，用其作为固相或酶标抗体不会呈现假阳性成果。
5.本身抗体 本身抗体如抗甲状腺球蛋白、抗胰岛索等，能与其相应靶抗原成果构成复合物，在ELISA办法中可搅扰相应原抗体的测定。为避免以上状况呈现，可在测定前用理化办法将其解离。
6. 溶菌酶溶菌酶可与等电点较低的蛋白有强的才能。免疫球蛋白等电点约为5，因而，在双抗体夹心法ELISA测定中，溶菌酶可在包被的IgG和酶标的IgG间构成桥接，然后致使假阳性。因而，为确保ELISA测定的可靠性，有必要从标本中去掉溶菌酶或将其关闭，Cu2+离子和卵白蛋白可有效地关闭溶菌酶，避免其衔接IgG。
内源性搅扰要素通常包含类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些本身抗体、因运用鼠抗体医治或确诊诱导的抗鼠Ig抗体、穿插反响物质等。在平时的临床血清（浆）标本中，有相当份额不一样程度的富含上述各种搅扰物质，然后致使测定成果的假阳性。