ELISA试剂盒试验室质量管理的要素是挑选和履行适当的室内质量操控(internal quality control,IQC)程序，例如根据测定项意图质量要求和办法特色挑选核算学规范、操控规矩和质控品的数目，并严格履行IQC程序以进步IQC的质量。室内质控办法许多，但酶联免疫吸附测定(ELISA)中仍首要选用Levey-Jennings质控图。笔者长时间从事免疫学查验质量管理工作。发现医院、血站查验科在实践工作中存在一些比较遍及的问题或疑问。根据本身实践经验，结合相关专著，扼要介绍如下，供试验室参阅。
1.质控品准预备
1.1 质控品浓度 以需求质控的点设值进行质控，般在Cut-of值(即CO值，是由试剂盒供给的公式核算出的阴、阳性判别规范)邻近选点。主张选点办法。挑选S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与S/CO值的乘积(意即3倍s)仍大于1的质控血清作为判别试验室重复性的室内质控点。
1.2 购买质控品主张用户购买质控品进行室内质量操控，这样的质控品的稳定性更有确保。首要项目在卫生部临床查验中心都有长时间供给(北京东单大华路1号北京医院内卫生部临床查验中心免疫质量操控室，：1O0730)
1.3 自制质控品的制备办法 (1)搜集阳性血清(无显着溶血、黄疽、脂血或污染血清)，累积到一定数量(够本室运用6月以上)；(2)混匀，经56℃ lO小时灭活，(3)离心或过滤，去除纤维沉淀物(4)用正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释．使S/CO值到达2～4之间(5)与定值参阅品进行比照，求测定值(6)将质控血清按0.2～O.5毫升/支分装、封口、贴签，置-2O℃保存。
2.ELISA试剂盒怎么正确运用“立刻法”进行质控不能随意运用“立刻法”，以下情况下可运用：(1)试验室不是每天进行ELISA项意图查验，而ELISA试剂盒效期短．用一批号试剂盒接连惯例检测2O次以取得RCV数据难度较大。选用“立刻法”质控核算办法，只需接连测3次，即可对第3次查验成果进行质控；(2)在某一检测项目开端预备展开Levey-Jennings室内质控，没有完结RCV测定时运用，其意图是尽早启动室内质控，在展开lI缶床试验的一起进行RCV测定，以便在获取满足数据后转入Levey-Jennings室内质控。因为数据量小，质控规矩单一，“立刻法”质控办法可靠性相对较差。在运用该质控办法时，有必要加强试验全程监控以确保质量，并在获取满足数据后及时转入Levey-Jennings室内质控。试验室需求替换质控品批号时，应提早开端下一批号质控品RCV靶值和规范差的测定，尽量防止运用“立刻法”质控办法。
3.质控规矩的挑选
一般以x靶±2s为正告限，以x靶士3s为失控限(这是*的判别试验成果是否失控的准则)，取得“惯例试验室质量操控图”空图。每次(或每天)随患者样本测定的质控物值，标记在质控图上。分析质控图中每天检测质控标本的成果散布，判别当天检测的成果数值是否在操控限之内。各试验室挑选失控*，应根据本室条件进行选定。失控限制得太宽，几乎不用忧虑有失控可能，这样常将失控成果误判为合格，使质控失掉含义；相反，失控限制得太严，使太多的成果乃至合格的成果判为失控，这也使质控失掉含义。根据本室条件，设定失控限，是室内质控重要的环节。Westgard多规矩质控分析法：在质控图中，单纯根据质控点超出2s为正告，超出3s为失控，在临床查验中已显不行。Westgard将常用的判别失控的规矩总结出许多条规矩，挑选质控规矩时有必要统筹室内质控对失控的检出才能及误判失控的可能性。在免疫学查验质控中，主张试验室挑选运用以下
几种质控规矩：(1)13s:1个质控点落在士3s之外；(2)R4s：接连2个质控点相差超出4s规模；(3)41s:接连4个质控点落在同一侧士1s之外；(4)7x靶：接连7个质控点落在均值之一侧；(5)7t：接连7个质控点呈接连上升或下降，或周期性动摇改变。质控规矩还有许多，各试验室可根据自己的实践情况挑选质控规矩。
4．替换试剂批号的处理方式
因为ELIsA试剂的效期相对较短，而在冷冻条件下，免疫质控血清效期相对较长，一个批号的质控血清往往要几个批号的试剂才会用完，因而试验中常会遇到替换试剂批号后怎么处理质控图的问题。替换不同厂家的试剂有必要从头核算RCV(在替换前完结RCV的测定，以免中止室内质控)。替换相同厂家不同批号的试剂，运用质控血清浓度值上下相邻的系列质控血清验证新批号试剂S/CO值的一致性。引荐对不同批号试剂间系列血清成果回归方程进行比较，以取得两批试剂间的换算因子，能够在同一质控图上持续描点。当换算因子为1时，运用实测S/CO值作图。从理论上说，两个回归方程经核算学查验差异无核算学含义时，能够连续运用上批号质控图。
5.分批质控办法
进行大批量标本的检测时存在批内变异与批间变异的问题。有的试验室每天需测验数百人的血清样品，运用数块乃至数十块微孔板这就存在同一天检测数块板之间的变异(批内变异)和不同天检测之间的变异(批间变异)的问题。引荐进行免疫试验室室内质控的批内、批间室内质量操控具体办法如下(以1 ncu/ml抗-HIV举例)。
5.1 每天进行多个酶标板检测，每板均进行室内质控标本测定，核算室内质控标本的S/CO值，见表1。核算上表各板质控数据均数的均值和规范差时需遵从RCV的核算准则。2o d均值的均数和规范差，即为批间变异的靶值和规范差()，以操控天间变异，也称批间变异,以2O天的规范差的均值作为批内规范差，以20天均值的均值作为批内靶值()，以操控天内不同检测批之间的变异，也称批内变异。
5.2 ELISA试剂盒批内和批问Levey-Jennings质控图的绘图办法批内Levey-Jennings质控图用每个酶标板质控S/CO值描点，以调查和操控各板之问的变异。批内Levey-Jennings质控图描点描在一张质控图上(留意区分，作好相应记录)，便于调查质控成果的会集趋势和离散程度，也能够按完结检测批的先后顺序描在数张质控图上，每天按相应批对应作图。批间Levey-Jennings质控图用宣布陈述时现已完结的各个酶标板质控S/CO值的均值描点，以操控日间变异。批间Levey-Jennings质控图绘图办法可能有不断定的时分，如完结批或第二批时，可能不知道是否还有第三批乃至第四批(关于医院体系尤其可能发生，因为当天标本数量不能断定，而先完结的陈述不可能等一切标本完结检测后才宣布)，笔者主张能够以当时已有质控S/CO值的均值描点，作为当时批间Levey-Jennings质控图，以判别已完结检测成果的质控状况；当有新的质控数据发生后，与前述质控数据(如有失控，则应剔除失控的质控S/CO值),核算S/CO值均值并描点，作为新的阅览Levey-Jennings质控图，以判别新完结检测成果的质控状况。批间Levey-Jennings质控图描点与批问Levey-Jennings质控图描点一样，既能够会集在一张质控图上作图，也能够按完结检测批的先后顺序分隔作图。