蔗糖系列_中性转化酶(NI)测试盒_微量法
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据适 pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。
NI主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。
蔗糖系列_中性转化酶(NI)测试盒_微量法
测定原理:
NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。