还原糖含量测试盒_糖代谢系列
测定方法:分光光度法
产品规格:50管/24样
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
还原糖广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。植物体内的还原糖主要包括葡萄糖、果糖和麦芽糖等,是常见的单糖和双糖,其中葡萄糖和果糖不仅是呼吸作用的主要底物,也是进一步合成蔗糖、淀粉和纤维素的底物。
还原糖含量测试盒_糖代谢系列
测定原理:
加热促进碱性溶液中3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖生成棕红色氨基化合物,在540nm有特征吸收峰;在一定的浓度范围内,还原糖含量与540nm吸光度成线性关系,根据标准曲线,即可求出样品中还原糖的量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:100mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:15mL×1瓶 ,4℃保存;
样品中还原糖的提取:
1、细菌或细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3S,间隔10S,重复30次),转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失),80℃水浴中40min并且振荡8~10次,8000g,25℃离心10min,取上清供测定用。
2、组织的处理:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.2g组织,加入2mL试剂一),冰浴匀浆,转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失),80℃水浴中40min并且振荡8~10次,8000g,25℃离心10min,取上清供测定用。
3、血清(浆)的处理:按照血清(浆)体积(mL):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议取0.2mL血清(浆)加入2mL试剂一),冰浴匀浆,转移到有盖离心管中(防止加热时水分散失),80℃水浴中40min并且振荡8~10次,8000g,25℃离心10min,取上清供测定用。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至95℃。