糖代谢系列_糖化酶(Glucoamylase)测试盒
测定方法:微量法
产品规格:100管/48样
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
糖化酶,即葡萄糖淀-粉酶(EC3.2.1.3),又称 γ-淀粉-酶,是一种外切型糖苷酶,它从淀粉的非还原性末端水解 α-1,4 糖苷键和 α-1,6 糖苷键,将淀粉*水解为葡萄糖,因此广泛的应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸,甘油,淀粉糖等工业中,是我国重要的工业酶制剂之一。
糖代谢系列_糖化酶(Glucoamylase)测试盒
测定原理:
糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,与 3,5-二硝基水杨酸生成红棕色化合物,在 540nm 处有大光吸收,在一定范围内反应液颜色深浅与葡萄糖的量成正比,可测定计算得糖化酶的活力。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、研钵、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。(若出现沉淀,可以 90℃加热 5 分钟溶解后使用)试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体:直接检测。