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阅读:156发布时间:2015-1-23
本实验zui终需要酶催化底物显色反应来完成,在*时间终止反应是ELISA试剂盒实验成功的重要因素。在HRP-TMB酶反应系统中,当zui高浓度标准品颜色不再变深,倒数2-3个浓度标准品颜色开始有浅蓝色时,便需要终止反应。“也可以根据zui高浓度标准品孔在620nm的OD值来决定,OD620=0.9-0.95之间时即可终止"。
ELISA试剂盒酶标仪读数的时候必须选用双波长是有什么原因呢?
因为:
1. 在使用酶标仪之前务必预热10-15min,
2. ELISA试剂盒实验采用双波长测定吸光度,可以排除单波长检测时的测定干扰。
一般采用zui大波长作为参照波长,在参照波长下,检测物的吸光值zui小,检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收;ELISA试剂盒因此,双波长测定,可zui大限度的消除指纹、ELISA试剂盒杂质及不透光的物质对酶标仪读数带来的误差,以保证实验数据的准确度。
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