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阅读:176发布时间:2015-3-31
ELISA检测试剂盒原理采用双抗体夹心ELISA法。实验时样品或标准品与包被抗体结合,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的抗体。抗体与结合在包被抗体上的结合,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值, LEP浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中LEP的浓度。
ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
目前在ELISA检测试剂盒实验中较为常用的方法就是借助于ELISA试剂盒和相关的实验仪器进行检测,在一定程度上提升了实验的准确性,更为经济实用,但是如果要具体到临床检测超低水平的蛋白,实验中所需用到的仪器并不便宜,也不是人人都承担的起。
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