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酶联免疫试剂盒的结果判断

阅读:132发布时间:2016-10-14

  酶联免疫试剂盒在实验条件(包括试剂)较难保证恒定的情况下,这种判断法较为合适。在得出标本( S)和阴性对照(N)的A 值后,计算S/N 值。也有写作P/N 的,这里的P 不代表阳性(positive),而是病人(pati ent)的缩写,不应误解。为避免混淆,更宜用S/N 表示。在早期的间接法酶联免疫试剂盒中,酶联免疫试剂盒有些作者定出S/N 为阳性标准,现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的 S/N 的阈值。更应注意的是,N 所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液,以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。

  酶联免疫试剂盒检测中试剂的结果判断之定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出 "有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作试剂的制备必须标准化,阳性和阴性的对照品应符合一定的规格,酶联免疫试剂盒须配用精密的仪器,并严格按规定操作。阳性判定值公式中的常数是在这特定的系统中通过对大量标本的实验检测而得到的。现举某种检测 HBsAg 的试剂盒为例。

  酶联免疫试剂盒中的阴性对照品为不含HBsAg 的复钙人血浆,阳性对照品HBsAg 的含量标明为P=9±2ng /ml。每次试验设2 个阳性对照和3 个阴性对照。测得A 值后,先计算阴性对照A 值的平均数(NC X )和阳性对照A 值的平均数(PCX),两个平均数的差(P-N)必须大于一个特定的数值(例0.400),试验才有效。3 个阴性对照 A 值均应≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范围,则弃去,酶联免疫试剂盒而已另两个阴性对照重新计算NCX;如有两个阴性对照A 值超出以上范围,则该次实验无效。


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