在实际工作当中有很多要素影响着免疫组化的成果，包括技能人员是不是娴熟掌握悉数试验的操作程序、抗体的特异性、办法的灵敏性、标本的固定、安排的处理、是不是进行抗原批改、批改液的PH值等等要素。为了让每个试验室能够继续稳定地完成牢靠的试验染色成果，应当将免疫组化染色技能中的悉数流程纳入标准化。虽然免疫组化在很多试验室中已惯例开展，但它是一个多过程、多要素决定的一种试验办法，由于各试验室选用的批改办法、染色办法、试剂厂家、抗体克隆号、检查体系等有所不一样，染色成果会呈现较大差异，适当部分的试验室对免疫组化标准化的知道尚欠足够注重, 致使不良的染色成果对病理确诊致使误导，因而免疫组化染色成果的牢靠性受到了*的重视。
一、 免疫组化成功的要素
病理科医师要有适当的免疫组化确诊常识和免疫组化技能经验，要明白知道免疫组化技能是一门试验性、技能性十分强的技能，要多了解多种抗体在安排中的表达情况，以及影响免疫组化成果的各种要素，只要进步医师的免疫组化确诊水平才干防止过错的判别，才干确保免疫组化确诊的准确性。病理技能人员是免疫组化试验成功的关键要素，操作人员要有丰厚的免疫组化的理论常识及娴熟的免疫组化染色技能，十分明白每一个过程的使用原理，使试验成果更具牢靠性。牢靠的试验试剂和试验办法是每个试验室的*条件。由于试验办法多种多样，抗体的品种繁多，每个试验室都应当确保高质量价的试剂，并摸索出的试验条件。优异的免疫组化取决于有用的抗原批改、灵敏的检查体系、适宜的试验质控对照及娴熟和有责任心的技能人员。
二、免疫组化染色前处理技能操作标准
1．选材：抱负的选材厚度是0.2cm～0.3cm，大多数试验室都以为安排在加热抗原批改过程中构成脱片的首要原因是选材过厚或脱水浸蜡处理不当所构成的。杰出的选材、固定、脱水过程是免疫组化质控的条件，假如H&E切片都做不出满足的染色成果，那么免疫组化染色也将无从谈起，底子无法确保染色质量。
2．固定：在很多的安排固定液中（如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛 等），不一样的试验办法在使用上各有千秋。但在坚持安排细胞构造的完整性、抗原可测定性、安排渗透性以及试剂的报价上，福尔马林是、既经济又通用。而含酸或含汞的固定液对抗原保留均不抱负。安排离体后固定通常不要超过30分钟，在常温条件下固定时间为8-24小时。一起还要留意防止福尔马林过度固定构成的安排抗原丢掉，有研究发现新鲜安排经过福尔马林一周固定后安排抗原丢掉严峻，抗原简直不能被检查，由于安排固定后会致使蛋白或蛋白分子之间构成交联，致使抗原位点隐瞒，能够经过抗原批改办法来批改，若加抗体前不选用抗原批改，则免疫组化染色常不能到达抱负成果或不成功。安排同样不能*放置在70%的乙醇中，酒精固定后的安排形状不如福尔马林固定的安排。脱钙液对抗原损坏较为严峻，因而在安排脱钙前在福尔马林液中固定48小时，若安排没有固定透则酸会损坏抗原，脱钙液中酸的浓度与脱钙时间都必须尽量控制在zui低的限度。
