ELISA试剂盒实验是现在临床实验科研实验中zui常用也是运用zui多的一种实验，它以灵敏度较高、特异性较好的特色取得很多实验者的认可，但在操作中的各个环节对实验的检查作用影响却很大，假如稍不留意，就有也许致使显色不全、花板等成果。
这篇文章中就着重为我们叙述一下ELISA试剂盒实验中常见疑问及解决方法，如有不全部，还请多指导！
1、挑选试剂
挑选质量优良的检查试剂，严厉依照试剂阐明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2、加样
也许因素：
(1) 血清或血浆标本别离欠好即进行加样；
(2) 手艺操作中，加样板过多形成加样后放入孵箱前等候时刻过长(特别是室内温度较高时)；
3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
(1) 标本为血清：将血液先天然寄存1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管，采血后有必要当即倒置*混合5-10次，放置一段时刻后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检查，可放在2-8℃冰箱中，若要储存，则置于-20℃的低温冰箱内。
(2) 加样后及时放入孵箱。
(3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(4) 假如选用AT或别的全自动加样，挑选FAME或别的后处理仪器加酶试剂。
(5) 标本较多时，请分批操作。
3、孵育
也许因素：
(1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洗*；
(2) 孵育时刻人为延伸，致使非特异性结合紧附于反响孔周围，难以清洗*。
解决办法：
(1) 贴封片或加盖；
(2) 按阐明过程严厉控制操作时刻。
4、洗板
也许因素：
(1) 选用手艺洗板,孔与孔之间液体穿插。
(2) 选用半自动洗板机洗板时，洗液量缺乏，致使洗板不*；洗板针阻塞，抽吸不*；洗板不畅，致使洗板作用差。
(3) 反响板过多形成洗板等候时刻长。
解决办法：
(1) 确保洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸(挑选洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干；
(2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5、显色
也许因素：
(1) 显色剂制造后放置时刻过长或运用过期显色剂；
(2) 加显色剂时溅出孔外形成液体回流。
解决办法：
(1) 显色剂尽量在临用前制造，坚持不期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必；
(2) 加样时坚持显色剂不外流；
(3) A、B液应避免触摸金属器械。
6、停止
也许因素如加停止液时发生较多气泡，致使假阳性添加。所以在加停止液时应避免发生气泡。
7、读板
如读板时板底不清洗等。应确保酶标板清洗。所以在整个操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸；尽也许实现ELISA试剂盒检查规范自动化，有用进步检查质量。
