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ELISA实验操作注意事项有哪些禁忌

阅读:1711发布时间:2017-7-24

酶联免疫吸附试验ELISA试剂盒因其操作简略,灵敏度高,特异性好,经济安全等特色而在临床上广泛应用,可是因为其操作进程杂乱,一般包含试剂预备,样本收集,加样,温育,洗刷,显色,比色,成果判定等,其间任何一项操作不妥都会对检查成果发生很大影响。

因而,必须加强ELISA检查的全部质量操控,保证其成果的牢靠。Elisa试验成果的影响要素包含检查样品要素、操作要素等。在试验操作的进程中有一些技能关键。

 

ELISA试剂盒操作
1、加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按阐明进程严厉操控操作时刻,防止孵育时刻人为延伸,致使非特异性紧附于反应孔周围,难以清洗*。
2、作时必须戴手套,穿作业衣,严厉健全和执行消毒隔离准则。
3、剩下样品及抛弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后抛弃。
4、同批号试剂组分不得混用。
5、在运用微量加样器时,汲取不一样瓶子中液体后要更换枪头,即便汲取规范品溶液。
6、汲取液体时
速度不易太快,防止发生气泡,汲取的量不行。
7、手工洗板时每次参加洗刷液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗刷液溅入另一酶标孔中,防止穿插污染。甩去洗刷液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
8、洗刷时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
9、每次试验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,仅仅zui终加底物溶液及2N H2SO4。丈量时先用此孔调OD值至零。
10、要保证微量加样器的性,能够运用蒸馏水和电子天平进行断定(因为蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水能够看作是lg、200 L的水能够看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行断定。
11、底物为TMB,防止与肌肤相触摸。停止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性,应尽量防止触摸肌肤。
ELISA检查操作进程杂乱,ELISA试剂盒可能会影响测定成果的要素较多,分布在测定操作的各个进程中,因而必须加强各环节的质量操控,才干得到牢靠的检查成果。

 

 

 

 


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