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江苏宝莱生物科技有限公司
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阅读:387发布时间:2015-3-9
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。
ELISA试剂盒洗涤液的使用原则:
1.某一项目的洗液建议使用该试剂盒内的洗液;
2.同一elisa试剂盒洗液用完了,建议采用同一批号的洗液;
3.同一批号的洗液也用完了,建议采用同一项目的试剂洗液;
4.同一项目的洗液用完了,建议使用该项目其他厂家的洗液;
5.同一项目所有厂家都用完了,建议采用同一系列项目的洗液(比如甲乙丙丁戊庚肝抗体检测,属于肝炎系列,急用时可以暂时混用);
6.不建议国产洗液与进口洗液混用,也更不建议不同系列项目的洗液混用,这两点都是因为洗液的配置成分不同,特别是不同项目的洗液(正规试剂厂家),主要组分都不太一样。虽然对强阳性标本影响不是很大,但对于临界阳性阴性(灰区)标本影响较大,所以不提倡不同系列项目洗液混用。
ELISA试剂盒的洗涤方式:
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔内反应液;
b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
(2)流水冲洗式
流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
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