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蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒

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所在地盐城市

更新时间:2018-06-04 20:24:22浏览次数:162次

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蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒实验原理: 用纯化的MT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、*化的MT抗体、HRP标记的亲和素,经 过*洗涤后用底物(TMB)显色。

名  称:蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒

  格:48T (仅用于科研,不得用于医学诊断)

  存:2-8,避光保存

有效期:6个月

蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒操作步骤

  1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

  1. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作

次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

  1. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  2. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  3. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
  4. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

蛋白激酶A(PKA)elisa试剂盒操作注意事项

  1. 试剂盒保存在2-8,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。
  2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
  3. 预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。
  4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

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