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豚鼠白三烯B4elisa试剂盒

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所在地盐城市

更新时间:2018-04-24 07:29:32浏览次数:248次

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产品名称:豚鼠白三烯B4elisa试剂盒

产品规格:96

保存条件:2-8

主要用途:科研检测

豚鼠白三烯B4elisa试剂盒操作步骤:

1.加样:分别设空白孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔加待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 

2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加辣根过氧化物酶标记抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl*标记抗体加99μl*标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。 

3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见孔内有明显蓝色,即可终止)。 

5.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 

6.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测

"实验在做到严格要求的同时有着一些不能忽视的小细节:

1.用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

2.液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

3.洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可*保存。

4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

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