本公司所销售的猪骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)elisa试剂盒只供科研,保证质量,如有任何质量问题,本司一律包退包换,咨询。
猪骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)elisa试剂盒测试步骤:
(1)仔细切开覆盖在孔板上的箔片,从微孔板底部用手指轻轻顶出所用的孔板。注意不要损伤不使用的孔板上的条或孔,而且应将其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存,以防止琼脂变干;
(2)揭开覆盖在孔板上的箔片,每孔加入80mL牛奶样品。并分别加入80mL的阴性和阳性质控,加入样品时应避免交叉污染;
(3)用密封胶将孔板密封,置于65℃恒温箱或水浴箱中孵育直到阴性质控转化成浅黄绿色(参照每批质量检测报告,大约需要1小时45分钟)。
注:如果是采用水浴进行孵育的话,请注意避免水进入微孔。样品孵育时间不能超过质检报告中说明的时间,否则检测灵敏度会下降。
猪骨钙素/骨*蛋白(OT/BGP)elisa试剂盒操作不当将引起较大的误差,以下叙述各个步骤中的影响因素:
1.加样,加样时速度不可太快,避免将标本加在孔壁上部 ,并注意不要溅出或产生气泡,产生气泡可以减少标本与包被物的接触,降低试剂的敏感性。不要让吸头接触孔底部,以防破坏包被物,吸附血清内的蛋白,造成假阳性。
2.温育,温育过程中,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。
3.洗涤,洗涤是ELISA测定过程中决定实验成败的一个关键步骤。其目的是去除反应体系中与反应无关的成分、未结合的酶结合物以及反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.显色,显色是 ELISA中的zui后一步温育反应,显色受时间和温度的影响,一般37℃反应30分钟可使显色充分,如果缩短反应时间或者降低反应温度均可影响检测的下限。
5.比色,ELISA显色的结果必须通过酶标仪进行检测,有两个重要的原因:一是不同的个体的色觉存在差异,如果仅凭肉眼判断,则结果重复性差,并且难以形成统一的判断标准,尤其是对于HBeAb、HBcAb这样的检测项目;二是日益频繁的医疗纠纷要求临床实验室必须对ELISA检测的原始吸光度值,阴阳性判断结果等原始数据进行保存,否则面对医疗纠纷时将无法举证。
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