人脱氧胶原吡啶交联(DPD)elisa试剂盒组成:
1.30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶
2.酶标试剂6ml×1瓶8标准品(40U/L)0.5ml×1瓶
3.酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶
4.样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份
5.显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张
6.显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个
人脱氧胶原吡啶交联(DPD)elisa试剂盒实验备注:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及终止液。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、*标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、*标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
人脱氧胶原吡啶交联(DPD)elisa试剂盒ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(2)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入
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