双缩脲法蛋白质含量测定试剂盒说明书
测定意义
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理
强碱性溶液中，双缩脲于SuSO4形成紫色络合物：紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1～10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
自备一起和用品
可见分光光度计、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一：液体×1 瓶 4℃保存。
标准品：液体×1 瓶，5 mg/mL，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取
1、液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。
2、组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5～10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水）冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测夜。（动物样品常常需要稀释）。
3、细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500～1000:1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）：然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
测定
1、分光光度计预热30min以上，调节波长到540nm，蒸馏水调零。
2、空白管：取1mL玻璃比色皿，加入200uL蒸馏水，1000uL试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A空白管。
3、标准管：取1mL玻璃比色皿，加入200uL标准液，1000uL试剂一，混匀后室温静置150min，于540nm比色，记为A标准管。
4、测定管：去1mL玻璃比色皿，加入200uL待测夜，1000试剂一，混匀后室温静置15min，于540nm比色，记为A测定管。
样品中蛋白质浓度计算
C待测（mg/mL）= C标准管×(A测定管- A空白管)÷(A标准管-A空白管)=5×(A测定管- A空白管)÷(A标准管- A空白管)
注意事项：
1、样品蛋白浓度须在 1～10mg/ml范围内低于1mg/ml能用法高于10mg/ml须做相应稀释因测定前用1～2个样做预实验确保蛋白浓度在1～10mg/ml范围内
2、待测样品蛋白提可用生理盐水、双蒸水或含蛋白的 PBS 提该法硫酸Tris 缓冲液干扰提液中应含这些物质否则改用 BCA 蛋白质含测定试剂盒
