动植物组织葡萄糖含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样
测定意义：
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的*能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。
测定原理：
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基*偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水
试剂的组成和配制：
试剂一：0.5μmol/mL 葡萄糖溶液 10mL×1 瓶，4℃保存；试剂二：液体 25ml×1 瓶，4℃保存；试剂三：液体 25ml×1 瓶，4℃保存；
葡萄糖提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 蒸馏水），研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸 10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，常温离心 10min，取上清液备用。
测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 505nm，蒸馏水调零。
2、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三 1:1 等体积混合，用多少配多少。
3、加样表（在 EP 管中加入下列试剂）：
试剂（μL） | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| | | |
样本 | | | 100 |
| | | |
试剂一 | | 100 | |
| | | |
蒸馏水 | 100 | | |
| | | |
混合试剂 | 900 | 900 | 900 |
| | | |
混匀，置 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴中，保温 15min，于 505nm 波长处读取吸光度。空白管、标准管和测定管吸光值分别记为 A1、A2 和 A3。空白管和标准管只要做一管。
葡萄糖含量计算：
一、葡萄糖含量(µmol/mg prot)=(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)=0.5×(A3-A1)÷ (A2-A1)÷Cpr。
二、葡萄糖含量（µmol/g 鲜重）= (C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=0.5×(A3-A1)÷
(A2-A1)÷W
C 标准：标准管浓度，0.5µmol/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。
注意：如果用计算方法一，需要另外测定蛋白浓度。
