每孔中先各加入样品稀释液100 ul,*孔再加标准品100 ul,混匀后用移液器吸出100 ul,移至第二孔,如此反复作对倍稀释至第7孔,zui后,ELISA试剂盒从第7孔中吸出100 ul弃去,使之体积均为100 ul。第8孔为空白对照。
1、以上标准孔及待查样品均建议做复孔,每次测定均要做标准孔。
2、本试剂盒宜置-20 ℃冷藏保存。
3、本小鼠ELISA试剂盒取出的试剂在室温（20~25 ℃）环境下使用,溶液应轻轻摇匀后使用。
4、本试剂盒含2M硫酸,不要将它与含*的废物混在一起。
5、板条开封后剩余板条要再封好,ELISA试剂盒保持板条干燥。
6、避免交叉污染。如洗涤时向样品待测蛋白含量可能高的一侧倾倒。
7、提前24 h打开烤箱预热。
8、底物工作液应在显色前5~10 min配制。若配制时间过长,会变质。
9、甩尽孔内液体,每孔加350 ul左右洗涤液,静止30 s后甩尽。尤其加抗体工作液或底物时尽量弄干孔内液体。ELISA试剂盒且孵育过程中要盖住各反应孔,防止液体恢复。
10、尽量防止样品待测蛋白浓度过高而出现酶标仪显示out。当酶标仪测定值出现许多out时,可通过稀释一定倍数后用可见光分光计测定,所有孔均同时测定。