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*2含量测定(紫外可见分光光度法)

阅读:4914发布时间:2017-4-27

 

*2又叫核黄素,微溶于水,在中性或酸性溶液中加热是稳定的。为体内黄酶类辅基的组成部分(黄酶在生物氧化还原中发挥递氢作用),当缺乏时,就影响机体的生物氧化,使代谢发生障碍。其病变多表现为口、眼和外生殖器部位的炎症,如口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎等,故本品可用于上述疾病的防治。体内*2的储存是很有限的,因此每天都要由饮食提供。*2的两个性质是造成其损失的主要原因:(1)可被光破坏;(2)在碱溶液中加热可被破坏。

 

1、实验仪器

UV722分光光度计(南京科捷分析仪器有限公司)采用微处理机控制技术,在可见光谱区域对物质做定性、定量分析,是常规实验室*的多用途分析仪器。广泛应用于医疗卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等大专院校、教学实验室部门。

 

2、试剂;

冰醋酸(AR)、氢氧化钠1mol/L(AR)、*2标准试剂(0.3mg/ml)、药片(含*2片)。

 

3、实验步骤:

(1)取待测片剂20 片,精密称定、研细,精密称取适量(约相当于*210mg),置于1000ml容量瓶中,加冰醋酸5ml与水100ml,置水浴(100℃)加热1小时,时时摇振,使*2溶解,加水稀释,冷却后加氢氧化钠液(1mol/L)30ml。用水稀释至刻度,摇匀,过滤;弃去初滤液,取续滤液,在444nm波长处测定吸收度,C17H20N4O6的吸收系数(E1%1CM444nm)为323计算。

 

(2)用移液管分别吸取2ml、4ml、5ml、6ml、8ml*2标准试剂(0.3mg/ml) 于5个100ml容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀。用紫外分光光度计分别测量5个 容量瓶中的VB2稀释液,得到5个吸收度数值A444nm。以VB2稀释液浓度为横坐标, A444nm数值为纵坐标,建立VB2浓度与吸收度的标准曲线,然后测出待测液的吸收度  数值,在标准曲线上找到相应的浓度数值即可。

 

4、实验结果:

(1)*2的紫外可见光谱扫描图

 

 

(2)*2标准工作曲线图

 

 


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