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液相色谱仪同时测定生物质乳酸发酵液中有机酸及糖类化合物

阅读:821发布时间:2017-6-15

乳酸(lactic acid),化学名称为2-羟基丙酸,分子式为CH3CH(OH)COOH,是一种含有羟基和羧基的有机酸,广泛存在于人体、动物、植物和微生物中,是食品工业中常用的酸味剂和防腐剂,也是医 药、化工、皮革、香料等工业的重要的原料。在乳酸发酵过程中,伴随产物乳酸生成的同时还有其他一些有机酸作为副产物而释放到环境中

用生物质水解液发酵制取乳酸(以下简称生物质乳酸)是近年来乳酸生产工艺改进的重要方向。测定生物质乳酸发酵液中糖及各种有机酸代谢成分组成的变化,对揭示其代谢途径以及控制发酵过程,进而从代谢工程角度改良菌种和优化发酵工艺条件具有重要的意义。

实验采用液相色谱法同时测定生物质乳酸发酵液中有机酸及糖类化合物。

 

仪器设备:

LC600B等度液相色谱仪

 

LC-600B智能全控液相色谱系统由1台P600B高压恒流泵、1台UV600B紫外检测器与1台SCL600B系统控制器直接构成等度分析系统。*采用柱塞浮动式安装方式,增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。

 

超纯水设备

 

 

依照“层层保护,逐级过滤”的设计理念,水质电阻率可达到18 25ΜΩ·cm(25℃),适用于各种标准实验、痕量分析、原子吸收、荧光分析、生化分析、环境分析、血清检查等用水。广泛应用于材料科学、生命科学、空间技术等领域中以及食品、药品、自然环境中微量元素和重金属元素检测实验。

 

样品预处理

取5mL发酵液,离心(10000r/min, 5min)除去菌丝体和碳酸钙,取上清液稀释适当倍数;取1mL的稀释液加入0.05mL的72%硫酸进行酸解使有机酸游离出来,离心(10000r/min,3min)除去硫酸钙,然后用0.22μm的滤膜过滤即得待测液。

 

色谱参考条件

色谱柱

Bio-Rad Aminex HPX-87H色谱柱(300mm×7.8mm,9μm)

流动相

5mmol/LH2SO4

流速

0.6mL/min

柱温

55℃

进样量

10μL

 

 


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