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南京科捷检测科技发展有限公司
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阅读：2569发布时间：2017-6-21
有机酸(如苹果酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、富马酸等)是果汁中主要的风味营养物质。果汁中的有机酸可以促进消化腺活动，有助于食物的吸收，改善患者的食欲。天然果汁营养丰富，深受消费者青睐。果汁中有机酸的含量的高低与果汁产品的品质有密切关系，同时也受生产技术和加工工艺的影响。乳酸是评价果汁产品质量的一项重要指标。在乳酸菌的作用下，果汁中的碳水化合物发酵生成乳酸，同时在合成苹果酸的过程中也会产生富马酸，因此，若苹果汁中含有富马酸，就有可能添加了合成苹果酸。然而，在不添加合成苹果酸的情况下，过度的加工条件也能产生富马酸，这是因为在果汁浓缩过程中，苹果酸受热会生成富马酸，因此，相同条件下生产的鲜榨苹果汁比浓缩苹果汁含有较少的富马酸。如果苹果汁中柠檬酸的含量超出一定的值，对苹果汁而言，可能加入了柠檬酸或其他果汁。
实验利用固相萃取-反相液相色谱法，对果汁中11种有机酸的进行检测。
仪器设备：
LC-600B等度液相色谱仪（配四元泵、二极管阵列检测器、自动进样器及色谱数据工作站）
LC-600B智能全控液相色谱系统由1台P600B高压恒流泵、1台UV600B紫外检测器与1台SCL600B系统控制器直接构成梯度分析系统。*采用柱塞浮动式安装方式，增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、监测等众多分析领域。
依照“层层保护，逐级过滤”的设计理念，水质电阻率可达到18.25ΜΩ·cm（25℃），适用于各种标准实验、痕量分析、原子吸收、荧光分析、生化分析、环境分析、血清检查、气相色谱以及液相等用水。广泛应用于材料科学、生命科学、空间技术等领域中以及食品、药品、自然环境中微量元素和重金属元素检测实验。
样品的提取与进化
称取浓缩果汁样品5.00g(至0.01g)，将pH调至8~10，加水定容至20mL，涡旋振荡溶解，使其混合均匀，以待下一步的净化处理。分别用5mL甲醇、5mL水预处理固相萃取小柱后，将稀释的果汁过柱富集，控制流速在1.0~1.5mL/min范围，依次用3mL5%氨水、3mL甲醇淋洗固相萃取小柱，弃去全部流出液，氮气吹干10min，用5mL5%甲酸甲醇洗脱，收集洗脱液，于40℃水浴中氮气吹干，zui后用流动相定容至1.00mL，过0.45μm微孔滤膜，取滤液用于U－PLC-MS/MS分析。
色谱条件
色谱柱 | Aichrom BondAQ C18(25mm×4.6mm，5μL) |
固相萃取柱 | Oasis MAX |
流动相 | 包括(A)0.02mol/L NH4H2PO4溶液(用H3PO4调pH至2.8)、(B)水，采用等度洗脱(体积比为99:1) |
流速 | 0.8mL/mim |
柱温 | 35℃ |
检测波长 | 210nm |
进样量 | 10μL |
色谱图分析
a.酒石酸； b.奎宁酸; c.苹果酸；d.莽草酸；e.Vc；f.乙酸;
g.马来酸；h.乳酸；i.琥珀酸；j.富马酸；k.柠檬酸。
A.有机酸的混合标准溶液；B.苹果汁;C.梨汁；D.石榴汁；E. 草莓汁
对照品和浓缩果汁样品色谱图
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