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南京科捷检测科技发展有限公司
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阅读：1326发布时间：2017-6-21
在苹果汁加工过程中,酚类物质与果汁中的蛋白质结合,形成大分子的聚合物,从而使苹果汁产生沉淀,影响苹果汁的产品质量。酚类物质是果实在生长代谢中的次生产物,它对植物的生长发育和调 节、基因的诱导表达、信号转导、紫外辐射的吸收、果蔬产品的褐变、生物固氮有一定的影响。
实验利用液相色谱分析酚类物质,采用反相C18柱,具有快速、操作简单、分离效果好和同时能将不同酚类物质分开等优点。
仪器设备
LC-600B智能全控液相色谱系统由2台P600B高压恒流泵、1台UV600B紫外检测器与1台SCL600B系统控制器直接构成梯度分析系统。*采用柱塞浮动式安装方式，增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
色谱分析条件
色谱柱 | Discovery C18柱150mm×4.6mm,Φ5μm |
流动相 | 甲醇和水 |
柱温 | 30℃ |
流速 | 1.2mL/min |
进样量 | 10μL |
检测器 | 紫外检测器 |
波长 | 280nm |
线性梯度洗脱 | 0～35min 98%甲醇和水;35～65min 68%甲醇和水;65～70min 98%甲醇和水。 |
样品的制备
（1）分析样品的制备:苹果皮5g(或肉10g),加入1mL 6mol/L的HCl,放置于石英砂中研磨;加50mL的蒸馏水用1 mol/L的HCl调pH至2.0;然后每次加入50mL的乙酸乙酯,萃取两次,搅拌5min,离心,分离出酯相和水相;将水相用6 mol/L的NaOH调pH至7.0,每次加入50mL的乙酸乙酯萃取2次,分离出酯相。将酯相在30℃下旋转蒸发,用N2气吹干,再用1mL的甲醇定容。
（2）果汁样品的制备:苹果汁50.0mL用1 mol/L的HCl调pH至2.0,然后每次加入50mL的乙酸乙酯萃取两次,搅拌5min,离心,分离出酯相和水相。酯相和水相的处理方法与分析样品的制备方法一样。
色谱图分析：
酚类物质标准样品的液相色谱图
1—儿茶酚; 2—儿茶素; 3—绿原酸; 4—表儿茶素;
5—根皮苷; 6—杨梅黄酮; 7—桑色素; 8—槲皮素;
9—柚苷; 10—山*素; 11—芹菜素
苹果果肉酚类物质液相色谱图
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