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色谱的基础入门知识你了解吗?

阅读:805发布时间:2018-1-2

一、色谱的起源

    色谱法起源于20世纪初,1906年俄guo科学家米哈伊尔·茨维特用碳酸钙填充竖立的玻璃管,以石油醚洗脱植物色素的提取液,经过一段时间洗脱之后,植物色素在碳酸钙柱中实现分离,由一条色带分散为数条平行的色带。由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带,因此茨维特将这种方法命名为Хроматография,这个单词zui终被英语等拼音语言接受,成为色谱法的名称。汉语中的色谱也是对这个单词的意译。   

    茨维特并非科学家,他对色谱的研究以俄语发表在俄guo的学术杂志之后不久,*次世界大战爆发,欧洲正常的学术交流被迫终止。这些因素使得色谱法问世后十余年间不为学术界所知,直到1931年德国柏林威廉皇帝研究所的库恩将茨维特的方法应用于叶红素和叶黄素的研究,库恩的研究获得了广泛的承认,也让科学界接受了色谱法,此后的一段时间内,以氧化铝为固定相的色谱法在有色物质的分离中取得了广泛的应用,这就是今天的吸附色谱

1.色谱法的发展历史表

1906

Tswett

用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。zui先提出色谱概念

1931

Kuhn,Lederer 

用氧化铝和碳酸钙分离α-、β和γ-胡萝卜素,使色谱法开始为人们所重视

1938

Lzmailov,Shraiber

zui先使用薄层色谱法

1938

Taylor,Uray

用离子交换色谱法分离锂和钾的同位素

1941

Martin,Synge

提出色谱塔板理论;发明液-液分配色谱;语言了气体可作为流动相(即气象色谱)

1944

Consden等

发明了纸色谱

1949

Macllean

在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板,使薄层色谱进入实用阶段

1952

Martin,James

从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法

1956

Van Demmter等

提出色谱速率理论,并应用于气相色谱

1957

Stein和Morre

发明基于离子交换色谱的氨基酸分析仪器

1958

Golay

发明毛细管柱气相色谱

1959

Porath,Flodin

发表凝胶过滤色谱的报告

1964

Moore

发明凝胶渗透色谱

1965

Giddings

发展了色谱理论,为色谱学的发展奠定了理论基础

1975

Small

发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相,采用抑制性电导检测的新型离子色谱法

1981

orgenson等

创立了毛细管电脉法

              

二、色谱定义

1.色谱法:利用组分在两相间分配系数不同而进行分离的技术

2.流动相:携带样品流过整个系统的流体

3.固定相:静止不动的一相,色谱柱

3.色谱是一种分离技术.

4.色谱的主要目的是对混合物中的目标物分离和定量

 

三、色谱分类

1、液相色谱 High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

2、气相色谱 Gas Chromatography (GC)

3、薄层色谱 Thin-Layer Chromatography (TLC)

4、毛细管电泳 Capillary Electrophoresis(CE)

 

四、色谱原理

    利用样品混合物中各组分理、化性质的差异,各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时,各组分在两相中反复多次重新分配,结果使混合物得到分离。

 

五、色谱优缺点

1、同时分析

2、分离性能好

3、灵敏度高 (ppm-ppb)

4、进样量小 (1-100uL)

HPLC vs GC

液相色谱:以液体作为流动相的色谱分离方法。

1、适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析。

2、流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用。

气相色谱:以气体作为流动相的色谱分离方法。

1、适用于沸点较低、热稳定性好的中小分子化合物的分析。

2、流动相只起运载样品分子的能力。

 

六、色谱的应用

经过多年的发展,离子色谱已经在生产生活的各种领域发挥着重要的作用。

1.环境分析

    离子色谱在其产生初期zui重要的应用便是环境样品的分析,其应用对象主要是环境样品中各种阴、阳离子的定性、定量分析。
    作为一种快速准确而有效果分析方法,离子色谱广泛应用于微电子、电力工业中高纯水、高纯试剂痕量杂质的分析。

2.食品分析

    与传统的分析方法相比,离子色谱法的突出优点是多组分同时进行分析,样品处理简单,因此成为食品和饮料中阴阳离子、有机酸、胺和糖类分析的较好方法。

3.联用技术

    离子色谱联用技术是离子色谱发展的一个方向。联用技术的发展,使得离子色谱分析技术的应用范围和检测灵敏度有了很大的提高,关于离子色谱--原子吸收(发射)光谱、离子色谱--电感耦合等离子体、离子色--质谱的联用已有不少报道。

 

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