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南京科捷检测科技发展有限公司
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阅读：463发布时间：2019-12-26
高效液相色谱(HPLC)Pico-Tag法因采用柱前衍生，反相色谱分离，具有分析时间短、灵敏度高、重现性好等优点，广泛地用于各种类型样品的氨基酸成分分析。
野蕨菜具有*的野味，无农yao污染，营养丰富，长期食用能延年益寿。因此广泛受到国内外人士的喜爱，尤其是东南亚各国朋友的喜爱。为此，我们HPLC Pico-Tag法对四川雅安地区野蕨菜氨基酸成分进行了测定，结果令人满意。
仪器准备
仪器简介
LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
溶液配制：
A液 19.0g三水醋酸钠，0.5mL三乙胺溶解于1L超纯水中。用冰醋酸调pH为6.4，用0.45μm滤膜过滤，取此液940mL,加入60mL乙腈，混匀，超声波脱气20s（或充氮保存）
B液 分别量取600mL乙腈，400mL水，混匀，超声波脱气20s备用。
样品稀释液 取710mg Na2HPO4加超纯水至1000mL，用10%磷酸-乙腈（95:5）调pH为7.4备用。
样品水解液 1g*溶解于6mol/LHCI100mL中
再干燥液 乙醇：水：三乙胺=2:2:1
衍生液 异硫氰酸苯（PITC）:乙醇：三乙胺：水=1:7:1:1
实验方法：
取整株鲜蕨菜切碎，于105℃烘至恒重，用研钵磨细，精确称取100mg左右样品放入180mm×18mm试管中，加6mol/L HCI 10mL,巯基乙醇20μL，正辛醇二滴，混匀，用0.45μm滤膜过滤。取滤液20μL，放入6mm×50mm小管，装入水解台，在60-100mT下干燥20-30min，加15μL再干燥液，混匀，干燥20-30min。加20μL衍生液，混匀，室温下放置10min。干燥之后，加入100μL样品稀释液，混匀，即可进样分析。
色谱条件：
色谱柱 | Pico-Tag HAA-Column 3.9mmi.d×150mm |
柱温 | 38℃ |
波长 | 254nm，0.1AUFS |
谱图分析：
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