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高效液相色谱法测定兔血清中*的浓度

阅读:557发布时间:2020-6-11

    *是一种新型氮杂螺环癸烷双酮类抗焦虑药物,由于其在治疗过程中具有不产生镇静作用以及不良反应少的优点,目前已成为较理想的抗焦虑药物。据有关文献报道,该药由于肝脏首过效应体内含量较低,其血药浓度测定方法仅有气-质联用法。文章采用高效液相色谱法,以甲基叔丁基醚提取血清样本测定浓度,方法分辨率高,可避免血清成分干扰,具有快速、准确、灵敏的特性,适用于临床药物研究及血药浓度检测。

仪器准备

 

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

 

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

 

血清样品处理:

精密量取血清样品2ml,置于具塞试管中,加入内标溶液10μl(含对羟基苯甲酸乙酯10μg/ml),旋涡振荡10s,加入1mol/L碳酸钠溶液1ml,旋涡振荡30s,加入甲基叔丁基醚-正己烷(1:1)混合溶液3ml,旋涡振荡2min,以3000r/min离心6min,吸取上层有机相,重复提取2次,合并提取液,以(60±1)℃水浴恒温氮气吹干,残渣加0.02mol/L HC1溶液200μl,旋涡振荡1min,再以1000r/min离心6min,吸取60μl进样,在色谱条件下测定记录内标及样品峰面积

谱条件:

 

色谱柱

ZORBAX SB - C18(4.6mm×250mm,5μm)

流动相

甲醇-乙腈-水-0.1mol/L醋酸钠缓冲液(pH4.5)(10:38:51:1)

流速

1.0mL/min

检测波长

237nm

zui低检出限

1.0ng/ml

 

谱图分析

 


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