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南京科捷检测科技发展有限公司
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阅读：561发布时间：2020-8-26
生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。可以看作是氨分子中1-3个氢原子被烷基或芳基取代后而生成的物质，是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱，常存在于动植物体内及食品中。生物胺引起的食品安全问题，也就是生物胺的毒性作用。其中组胺对人类健康的影响*大，其次是酪胺。除了组胺、酪胺本身的作用外，其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的不良作用。
高效液相色谱具有分析速度快、柱效高、检测灵敏度高、定量分析准确的特点，是目前食品中生物胺含量分析测定的主要手段。生物胺分子中缺少发色基团，本身既无紫外吸收、又无荧光及电化学活性。为了提高检测的灵敏度及其响应，必须衍生后才能检测。
本文以丹酰氯为衍生试剂，采用柱前衍生--高效液相色谱法来分析食品中组胺的含量，通过对市售不同品牌的大豆发酵制品（豆豉、豆酱和酱油）、酸奶和啤酒中组胺含量的测定，对各种食品的组胺含量有一个初步的了解，为保障食品安全提供技术依据。
仪器准备
仪器简介
LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。
应用领域
化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析
柱前衍生
取样品提取液0.25mL,加入25μL2mol/L的氢氧化钠调节pH值，加入75μL饱和*溶液和0.5mL10mg/mL丹酰氯-丙酮溶液，摇匀，于40℃水浴下避光反应45min；反应毕，取出加入25μL25%的浓氨水，静置30min，用乙腈定容至1.25mL，振荡混匀。将衍生后溶液用0.45μm针头微孔滤膜过滤器过滤，用高效液相色谱测定。
色谱条件：
色谱柱 | Hypersil-C18色谱柱（250×4.6mm I.D .粒径5μm） |
柱温 | 室温 |
流动相 | V（乙腈）：V（水）=60:40 |
流速 | 1.0mL/min |
紫外检测波长 | 254nm |
进样量 | 20μL |
采样时间 | 30min |
谱图：
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