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免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法检测粮油中黄曲*毒素

阅读:448发布时间:2020-9-7

    目前对食品、农产品中黄曲*毒素的检测方法主要有薄层色谱法、酶联免疫吸附法、免疫亲和柱净化荧光光度法和免疫亲和柱净化高效液相色谱法等,前2种方法定量准确度较差,第3种方法只能测定黄曲*毒素总量。免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱法具有简便、快速、净化效果好的特点。

 仪器准备

 

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析 

提取与净化:

   准确称取25.0g粮油样品于250mL均质杯中,加入5g氯化钠、125mL甲醇-水(体积比为70:30),高速均质2min,用槽纹滤纸过滤到干净的烧杯中。取20mL滤液,加入20mL水稀释混匀,用玻璃纤维滤纸过滤。取滤液10mL,以1-2滴/s的速率将其通过Afla-Test P免疫亲和柱,直至空气吹出柱内的全部液体,再用10mL超纯水以1-2滴/s淋洗亲和柱直至空气吹出柱内的全部液体。*后用1mL色谱纯甲醇淋洗亲和柱,收集淋洗液于玻璃试管中,加1.0mL纯水于洗脱液中,旋涡混匀器混匀供HPLC测定。

谱条件:

色谱柱

Cloversil C18柱(4.6mm i.d.×150mm×5.0μm)

流动相

甲醇-水(50:50)溶液

流速

1mL/min

荧光检测器

激发波长360nm,发射波长440nm

柱温

30℃

进样量

20μL,进样前2min打开光化学衍生池检测黄曲*毒素

谱图分析

 

 

 


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