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上海岚派生物科技有限公司
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阅读:776发布时间:2016-1-5
关于Elisa试剂盒操作步骤的详细说明
ELISA试剂盒是上海岚派生物科技有限公司主营产品,公司专业从事生物实验新产品研发与销售、技术咨询与服务为一体的高科技企业。是国内生物试剂研发与生产,销售合为一体的创新型企业,产品应用在分子生物学、细胞生物学、免疫学、仪器仪表等多个研究及应用领域。主要产品有生化试剂(进口国产)、培养基、动物血清、抗原、抗体、实验试剂、Elisa试剂盒、实验室仪器等等。下面有关Elisa试剂盒实验的操作步骤简单给大家介绍下:
ELISA试剂盒操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37℃溶解;试剂或样品配制时,均需充分混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l,待测样品孔中先加样品稀释液40?l,然后再加待测样品10?l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50?l,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50?l,再加入显色剂B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
7、终止:每孔加终止液50ml,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
以上Elisa试剂盒实验操作步骤仅供大家参考。
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