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MMP-2 ,MMP-9活性检测试剂盒(明胶酶谱法)检测原理

时间:2015/6/23阅读:2550
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       酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,zui后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在 蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。
 
        复性原理:在电泳过程中,SDS与样品中的MMPs结合(当然是可逆性结合),破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用,而只有当将胶置Trition中洗脱(是放在摇床上摇,30min/次,做2次或15min/次,4次。静置于Trition中是不妥的。)时,由于SDS被Trition结合而去除,从而使MMPs恢复了活性。

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