信帆生物教你处理人类样本

  很多科研工作者都会使用人类样本进行科学研究，样本因获取不易而珍贵无比。珍惜人类样本，需从样本处理开始。以下的一些样本处理技巧，或许可以帮助您，消除实验中的干扰物质。

一：多次磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤

  磷酸盐缓冲液（PBS）几乎深得所分子生物学家的喜爱，因为PBS通常不会裂解或损坏细胞，同时允许重复洗涤。

  如何使用：如果你想要的组织被覆盖在血液中，用30-40mL冷PBS洗涤并轻轻摇动。将剩余的大部分组织转移到新的EP管中，用于后续洗涤（每次洗涤都将增加细胞得产量）。几次洗涤后，的组织将没有血液和基质细胞。如果您想捕获非粘连组织或细胞，请记住保存并离心用于洗涤的每个PBS管。

  注意：使用PBS洗涤zui适用于上皮细胞的分离。洗涤也可以用来温和地去除粘附在您感兴趣的组织上的基质细胞。

二：通过预包被板分离目标细胞

   不同的细胞对胞外基质蛋白或类似化合物具有不同的亲和力。由于不同的粘附力，您可以快速，轻松将细胞系和预包被板共孵育，去除未结合细胞，从而分离目标细胞。胶原蛋白（用于上皮细胞）或多聚赖氨酸（用于多种细胞类型）就是很好的预包被材料。

  注意：您需要事先评估目标细胞是否与底物相互作用（例如，一些细胞系能优先附着多聚赖氨酸，因为它们产生指向多聚赖氨酸的蛋白酶）。

三：利用特异性染色检查细胞纯度

  您可以使用高度特异性标记物，如上皮细胞标记物—E-钙粘蛋白或其他细胞类型来检查细胞纯度。一旦细胞群以上述方式大规模纯化后，再通过常规染色方法验证小的亚群。您可以通过显微镜或使用可用肉眼看到的显色底物来观察情况。

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