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钙离子检测试剂盒,钙离子试剂盒现货供应
钙离子检测试剂盒说明书
一.检测原理:样本中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合,生成蓝色络合物;
通过比色与同样处理的钙标准溶液进行比较,可计算出样本中钙的含量。
二.测定范围:本试剂盒可以测定各类动物血清(浆)、组织等样本中钙的含量。
三.自备仪器和用品:
酶标仪(610nm)、微量移液器、漩涡混匀器
四.试剂组成:
96T 规格组分保存
试剂一10mlX1 瓶MTB 试剂4℃避光保存6 个月
试剂二20mlX1 瓶碱性溶液室温保存6 个月
试剂三1mlX1 瓶蛋白澄清剂室温保存6 个月
试剂四1mlX1 支2.5mmol/L 钙标准液4℃避光保存6 个月
1mmol/L 钙标准液的配制: 用去离子水将2.5mmol/L 钙标准液进行2.5 倍稀释(即2:3 稀释)
工作液I 的配制: 试剂一:试剂二= 1:2 的比例进行配制,现用现配(测血清、血浆样本)
工作液II 的配制: 试剂一:试剂二:试剂三=10:20:1 的比例进行配制,现配现用(测组织样本)
五.样本要求:
A.按常规检验要求采集处理样本,样本可以是血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清。
B.样本2-8℃可稳定3-4 天,-20℃以下可稳定数月。
六.测定步骤
A.血清(浆)操作步骤
空白孔标准孔测定孔
去离子水(ul) 10
1mmol/L 钙标准液(ul) 10
血清(浆) 10
工作液I(ul) 250 250 250
混匀,静置5 分钟,波长610nm,酶标仪测定各孔的OD 值。
注:实验前可先将96 孔板用酶标仪读取并记录空白OD 值,以保证实验的度。
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计算公式:
B.组织或细胞匀浆的操作步骤
(1)前处理:准确称取组织重量按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例加入9 倍体积的去离
子水,冰水浴匀浆,2500 转/分,离心10 分钟,取10%的匀浆上清液待测。
(2)操作:见说明书
注:实验前可先将96 孔板用酶标仪读取并记录空白OD 值,以保证实验的度。
计算公式:
注:*gprot/L 为克蛋白/升
七.注意事项:
1.实验应避免钙污染,建议用一次性96 孔板操作。
2.严重溶血,黄疸或脂血对结果有影响。
3.制备组织匀浆时,应选用去离子水作为匀浆介质,避免钙污染。
4.本试剂盒可上全自动/半自动生化分析仪
5.测定组织或细胞中钙离子含量,同时测定总蛋白浓度。
6.本试剂盒仅用于科研。
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