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1402次植物原花青素??Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC??试剂盒
说明书
(分光光度法50T/24S)
测定意义
原花色素??Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC??是一类黄烷醇单体及??聚合体的多酚化合
物,广泛存在于植物的各种器官中,????*的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用
于医药,食品,化妆品,保健品行业??
测定原理
在酸性条件??,植物原花青素A 环??的间苯??酚和间苯??酚??香草醛发生缩合??应,产生
??色化合物,在500nm 处??特征吸收峰,测定500nm 光吸收值,可??算植物中原花青素的
含????
自备实验用品及仪器
天????常温离心机??可见分光光度????1 mL 玻璃比色皿??蒸馏水??8%盐酸和60%乙醇??
试剂组成和配制
提取液??60%乙醇,自备,4℃保存??
试剂一??8%盐酸20mL,自备,4℃保存??
试剂????粉剂0.2g×1 瓶,4℃避光保存,临用前?? 20mL ??蒸水溶解??
工作液??临用前按照用??将试剂一和试剂??按照1:1 混合??
OPC 提取
将样本烘??至恒重,粉碎,过40 目筛之后,??取约0.1g,??入2.5mL 提取液,用超声提取
法进行提取,超声??率300W,破碎5s,间歇8s,提取30min, 12000rpm,25℃,离心10min,
取??清,用提取液定容至2.5mL,待测??
测定操作表
对照管 测定管
样本??μL?? 200 200
工作液??μL?? 800
H2O??μL?? 800
混匀,30℃水浴30min, 1mL 玻璃比色皿,对照管调零,测定A500??
OPC ??算公式
标准曲线??y=0.0194x+0.0006,R2=0.999
OPC 含????mg /g??=
0.0194
0.0006 500 A −
×V ??总÷(V 样÷V 样总×W)×10-3
= 0.644×(A500-0.0006 ) ÷ W
V 样总????入提取液体??,2.5mL?? V ??总????应总体??,1mL??V 样????应中样品体??,
0.2mL?? W??样品质??,g
注意??项
1??配制好的试剂??应尽快使用,4℃保存时间??超过一个????
2??吸光度变化应该控制在0.05~0.8 之间??否则??大样品??或稀释样品,注意??算公式中参
????算的稀释倍数要相应改变??
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