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油红O染色实验代测

油红O染色简介：

油红O对脂滴的染色机制一般认为是物理学上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂质染色，即油红O先溶于60%异丙醇中，然后切片浸入油红O染液中时，油红O在组织脂质的溶解度较60%异丙醇中的溶解度高，所以在染色时油红O从60%异丙醇中转移入脂质中使脂滴显示红色。

油红O染色步骤（仅供参考）：

1、 固定：将冰冻切片复温干燥10min；细胞爬片4%多聚甲醛固定15min，PBS漂洗3次，5min/次。

2、 染色：入油红O工作液孵育10-15min；细胞爬片破膜10-15min，PBS漂洗3次，5min/次，入油红O工作液37°染色1-2h。

3、 分化：75%酒精分化2s，水洗1min。

4、 复染细胞核：Harris苏木素复染1-2min左右，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，氨水返蓝，流水冲洗。

5、 封片：用纸巾吸去周边水分，甘油明胶封片。

染色结果：脂滴呈橘红色至鲜红色，细胞核蓝色。

注意事项：

1、油红O是对脂类物质进行染色，石蜡切片在处理过程中脂类物质无法保存，所以石蜡切片不能进行油红O染色。

2、油红O染液使用一段时间后，染出的脂滴颜色会偏黄，此时就需要更换染液。

3、油红染色时，动作要轻，因为脂滴易移位，并且在封片时应避免盖玻片滑动；

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