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LFB染色实验代测

LFB染色介绍：

劳克坚牢蓝(Luxol fast blue，简称LFB），是对皮肤组织神经中髓鞘，脑，脊髓，（蓝色，背景红色）进行染色。

LFB染色实验步骤（仅供参考）：

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2、染色：切片置于0.1% LFB染液60℃孵育过夜，自来水冲洗；

3、分化：切片放入70%乙醇中（无固定时间）；切片浸入0.05% *中，镜下控制分色时间至分色*（可见灰质部分颜色变淡）；如分化不好这两步交替进行几次至镜检满意，水洗；

4、伊红复染：0.1%伊红复染1min，水洗；

5、封片：电吹风吹干或烘箱吹干；二甲苯透明数分钟，中性树胶封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

染色结果：神经髓鞘呈蓝色；其他成分呈红色。

注意事项：

1、染色前，固蓝溶液需要预热，染液温度会对标本着色强弱有一定影响。
2、70%的酒精和0.05%*分化可以反复进行，直至灰质变为无色或者淡蓝色。
3、固蓝染完冷却从固蓝拿出后，需要尽快分化，玻片不能长时间放在水中也不能长时间放在外面使组织干掉。在水中浸泡时间过长，固蓝的颜色会掉，会导致染色特异性不明显；组织干了，会导致再分化时，分化不均匀。

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