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胆-碱酯酶(CHE)测定试剂盒
(比色法)
一、测定原理:
血液及组织中 CHE 使乙酰胆-碱水解成胆-碱和乙酸,未
被分解的剩余乙酰胆-碱与羟胺作用生成乙酰羟胺,再与铁离
子在酸性溶液中形成棕色复合物,根据颜色深浅推算出酶的
活力。
二、试剂组成与配制:(50 管/48 样)
试剂一:溶液 60mL×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂二:乙酰胆-碱粉剂×1支,
-20℃保存6个月,稀释液5mL×1
瓶,4ºC 保存 6 个月;80mmol/mL 乙酰胆-碱底物贮
备液的配制:将 1 支乙酰胆-碱粉剂倒入 5mL 稀释液
中溶解,4ºC 保存;8mmol/mL 乙酰胆-碱应用液的
配制:按 80mmol/mL 乙酰胆-碱底物贮备液︰试剂一
= 1︰9 的比例进行稀释,现用现配,用多少配多少。
试剂三:甲粉×1 支;乙液 30 mL×1 瓶;丙液 30 mL×1 瓶;
室温保存 6 个月。测试前将甲粉倒入乙液中,充分
摇匀,根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合,
充分混匀,配成试剂三应用液,现用现配。
试剂四:溶液 30 mL×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂五:溶液 20 mL×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂六:粉剂×1 瓶,稀释液 30mL×1 瓶, 4℃避光保存 6 个月。
测试前将稀释液倒入粉剂中,充分混匀溶解后备
用。
三、操作步骤:
(一)、血清(浆)、组织的测定:
1、样本前处理:
血清(浆):直接进行检测。
组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9
的比例,加入 9 倍的生理盐水,冰水浴条件下匀浆,制成
10%的匀浆液,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待
测。同时用 BCA 法或考马斯亮蓝法试剂测定组织蛋白。
胆-碱酯酶(CHE)测定试剂盒
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