产品简介：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色，简称 HE 染色，是病理学常规制片中zui
基本的染色方法，应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的
结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)
一起使用，能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中，常用 HE 染色对正常组织
和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质不特
殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察
HE 染色组织切片的基础上进行的。在 HE 染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红
色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene 苏木素伊红染色液中，*采用 Leagene 自主研发的配方，由进口
的高纯度苏木精、氧化剂等组成，不含甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。其
特点是丌易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用
于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；*可以重复使用。
染色原理：
1、 细胞核染色的原理：
苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA，在 DNA
双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸
性，很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性
溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、 细胞浆染色的原理：
伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是
蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞
浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可
被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，不胞浆蛋白质带正
电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
3、 分化作用：
染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所
用的溶液称为分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素
的醌型结构，使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用 1%盐酸
乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊
红染色，才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。
4、 返蓝作用：
分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色
离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切
片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返
蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
产品组成：
自备材料：
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液，如稀氨水、*溶液等
3、等系列乙醇
4、4%多聚甲醛
操作步骤 (仅供参考) ：
(一)石蜡切片染色
1、 切片脱蜡至水
①? 二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。
②? (可选)无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。
③? 95%的乙醇 3～5min
④? 90%的乙醇 3～5min
⑤? 80%的乙醇 3～5min
⑥? 自来水或蒸馏水冲洗 1～3min
2、染色
①? Leagene *染色 5～8min
②? 自来水或蒸馏水冲洗 5～10s
③? (可选)盐酸乙醇分化 2～5s
④? 自来水冲洗 20～30s
⑤? 蓝化液返蓝 20～40s
编号
名称
DH0006 DH0006 Storage
试剂(A): Leagene * 100ml 500ml RT 避光
试剂(B): 伊红染色液 100ml 500ml RT 避光
使用说明书 1 份
⑥? 自来水冲洗 30～60s
⑦? 伊红染色液染色 3～5min
⑧? 自来水冲洗 1～5s
2、脱水、透明、封固
①? 80%乙醇 10～20s
②? 90%乙醇 10～20s
③? 95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。
④? 无水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。
⑤? 二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。
⑥? 中性树脂封片。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅丌一的红色；
角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙醚-乙醇混合固定液 5～10s
2、自来水冲洗 2～5s
3、Leagene *滴染 1～2min(可加热至 50℃)。
4、自来水冲洗 2～5s
5、(可选) 盐酸乙醇分化 2～5s
6、自来水冲洗 2～5s
7、蓝化液返蓝 2～5s
8、自来水冲洗 5～10s
9、伊红染色液染色 2～5s
10、自来水冲洗 1～2s
11、80%的乙醇 1～2s
12 、95%的乙醇 1～2s
13、无水乙醇 2～5s
14、*二甲苯(1:3) 2～5s
15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s。
16、中性树脂封片
备选方案：
1、 无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗 2～3min.
2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10～20min。
2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。
3、 蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2、 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时
间应该足够，以便*清洗酸。
3、 乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和 95%乙醇等量混合而得，再加入适量乙酸，密闭保存。
4、 冷冻切片染色时间尽量要短。
5、 蓝化液常使用 0.2～1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1～1%*溶液。
6、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。
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