ELISA试剂盒试验中洗涤是一个*的部分，因为洗涤步骤可降低未结合抗体所引起的背景信号，从而增加分析的信噪比，每一步之间的洗涤确保只有特异的结合事件被保留，在zui后一步产生信号。用户可以通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。而不充分的洗涤会导致差异和高背景，从而带来不理想的结果。所以说洗涤是ELISA试剂盒实验中*的部分，操作人员应该重视起来，不可马虎大意。
ELISA试剂盒实验中该如何洗涤？
（1）浸泡式
a.吸干或甩干孔内反应液；
b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；
c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1～2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；
d.吸干孔内液体。吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；
e.重复操作c和d，洗涤3～4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
ELISA试剂盒微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%～0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（2）流水冲洗式
流水冲洗法zui初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为*，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
ELISA试剂盒实验中洗涤后为什么要静置
洗涤只是洗掉反应中的非特异性吸附，可采用静置或者振荡的方式，静置是让洗涤液充分洗掉未结合的酶标物或其他的物质。
