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上海常斤生物科技有限公司
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阅读:139发布时间:2015-11-27
下游应用为基因筛选、测序、突变检测和分子诊断等等的用户,对PCR保真性要求很高。
降低PCR扩增的错误率可以通过使用各种具有高保真性的dna聚合酶来实现。
DNA聚合酶的保真度用错误率来表示,包括碱基错配率、PCR产物突变百分数等。
在目前已发现的所有耐高温DNA 聚合酶中,Pfu酶的出错率zui低,保真度zui高(见附表)。
除对酶进行选择,研究者也可通过优化反应条件来进一步减少PCR突变率,包括优化缓冲液组成、耐热聚合酶的浓度及对PCR循环条件进行优化等。
附表: DNA聚合酶的扩增错误率
耐热DNA聚合酶
碱基错配率
★PCR产物突变百分数(%)
Pfu DNA Polymerase
1.3×10-6
2.6
Taq DNA Polymerase
8.0×10-6
16.0
VentR ® DNA Polymerase
2.8×10-6
5.6
Deep VentR ® DNA Polymerase
2.7×10-6
5.4
Tfl DNA Polymerase
8.3×10-6
16.6
Tbr DNA Polymerase
9.5×10-6
19.0
ΜlTmaTM DNA Polymerase
55.3×10-6
110.6
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